莃高效液相色谱法:聿系选用高压输液泵将规则的活动相泵入装有填充剂的色谱柱,对供试品进行别离测定的色谱办法。膈注入的供试品,由活动相带入色谱柱内,各组分在柱内被别离,并进入检测器检测,膇由积分仪或数据处理体系记载和处理色谱信号。、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理体系组成。~,填充剂粒径为3~10μm。羈超高液相色谱仪:是习惯小粒径(约2μm)填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、膂高灵敏度检测的高效液相色谱仪。薀(1)色谱柱肇反相色谱柱:蚈以键和非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等;常用的填充剂优十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。芃袃正相色谱柱:螀用硅胶填充剂,或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶膄和氰基键合硅胶等。氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反向色谱。芅肁离子交流色谱柱:用离子交流填充剂填充而成的色谱柱。有阳离子交流色谱柱和阴离子交流色谱柱。膀羅手性别离色谱柱:用手性填充剂填充而成的色谱柱。肂腿蕿蚅色谱柱的内径和长度,填充剂的形状、粒径与粒径散布、孔径、外表积、键合基团的外表掩盖度、载体外表基团残留量,填充的细密与均匀程度等均影响色谱柱的功能,应根据被别离物质的性质来挑选正真合适的色谱柱。膃温度会影响别离作用,种类正文中未指明色谱柱温度时系指室温,应留意室温改动的影响。为改进别离作用可恰当进步色谱柱的温度,但一般不宜超越60℃。蒂剩余硅羟基未关闭的硅胶色谱柱,活动相的pH值一般应在2~8之间。剩余硅羟基已关闭的硅胶、聚合物复合硅胶或聚合物色谱柱可耐受更广泛pH值的活动相,合适于pH值小于2或大于8的活动相。肈莅(2)检测器芅最常用的检测器为紫外-可见分光检测器,包含二极管阵列检测器,蚀其他常见的检测器有荧光检测器、蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测器等。蒈膆紫外-可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器为挑选性检测器,肂其呼应值不只与被测物质的量有关,还与其结构有关;羃袇蒸发光散射检测器和示差折光检测器为通用型检测器,袆对一切物质均有呼应,结构类似的物质在蒸发光散射检测器的呼应值简直仅与被测物质的量有关。肃肁紫外-可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器和示差折光检测器的呼应值与被测物质的量在一薁定规模内呈线性联系,蚇膅但蒸发光散射检测器的呼应值与被测物质的量一般呈指数联系,一般需经对数转化。腿不同的检测器,对活动相的要求不同。羀紫外-可见分光检测器所用活动相应契合紫外-可见分光光度法(公例0401)项下对溶剂的要求;莇选用低波长检测时,还应考虑有机溶剂的截止运用波长,并选用色谱级有机溶剂。羂蒸发光散射检测器和质谱检测器不得运用含不挥发性盐的活动相。薂葿膇(3)活动相羄反相色谱体系的活动相常用甲醇-水体系和乙腈-水体系,用紫外结尾波长检测时,宜选用乙腈-水体系,活动相中应尽或许不必缓冲盐,如需用时,应尽或许运用低浓度缓冲盐。蚀用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱时,活动相中有机溶剂一般不低于5%,不然导致柱效下降、色谱体系不稳定。衿袈正相色谱体系的活动相:常用两种或两种以上的有机溶剂,如二氯甲烷和正己烷等。肅肂种类正文项下规则的条件除填充剂种类、活动相组分、检测器类型不得改动外,其他如色谱柱内径与长度、填充剂粒径、活动相流速、活动相组分份额、柱温、进样量、检测器灵敏度等,均可恰当改动,以到达体系习惯性实验的要求。芈调整活动相组分份额时,当小份额组分的百分份额X小于等于33%时,~;薈当X大于33%时,答应改动规模为X-10%~X+10%。袂若需运用小粒径(约2μm)填充剂,输液泵的功能、进样体积、检测池体积和体系的死体积等有必要与之匹配;如有必要,色谱条件也应作恰当的调整。当对其测定成果发生争议时,应以种类项下规则的色谱条件的测定成果为准。膁当一定要运用特定商标的色谱柱方能满意别离要求时,可在该种类正文项下注明。:一般包含理论板数、别离度、灵敏度、拖尾因子和重复性等五个参数。莆袄膂色谱体系的适用性实验界说:虿按各种类正文项下要求对色谱体系来进行适用性实验肆即用规则的对照品溶液或体系适用性实验溶液在规则的色谱体系来进行实验,袅必要时,可对色谱体系来进行恰当调整,以契合规范要求。芁膈(1)色谱柱的理论板数(n)螆用于点评色谱柱的别离效能。蚂因为不同物质在同一色谱柱上的色谱行为不同,选用理论板数作为衡量柱效能的目标时,蚃应指明测定物质,一般为待测物质或内标物质的理论板数。薈薇在规则的色谱条件下,注入供试品溶液或各种类项下规则的内标物