反相高效液相色谱中运用的固定相大多是各种烃基硅烷的化学键合硅胶。烷基链长可所以C2、C4、C6、C8、C16、C18和C2等,最常用的是C18(又称ODS),即十八烷基硅烷键合硅胶。键合烷基的链长对键合相的样品负荷量、溶质的容量因子及其选择性有不同的影响,当烷基键合相外表浓度(mol/m2)相一起,跟着烷基链长添加,碳含量成份额添加,溶质保存值添加。
199年, 某公司选用带有二丁基或异丙基等较大基团的卤代硅烷替代甲基鹵代烷进行外表硅烷化制备键合固定相,被称作SB技能。因为位阻效应,较大的疏水基团从空间上起到了维护硅胶外表的效果,可显着下降硅胶的水解效果,削减键合相的丢失,固定相安稳运用pH值上限到达9.0以上。SB技能处理了C8、CN和Ph固定相,特别是CN固定相的安稳性问题。
有些硅烷键合相(如C8、C18)的出产厂商选用被称为“封尾”( endcapping)的工艺,使硅胶担体外表彻底反响(硅烷化)。封尾包含键合固定相与小分子硅烷进行的后续反响,如三甲基氯硅烷、二甲基二氯硅烷或(不常常的)六甲基二硅氮烷。这种办法经过反响掉一些剩余硅羟基,添加担体的覆盖率,以最好能够下降与溶质产生不良效果。但是,封尾也并不能彻底战胜酸性硅胶担体的缺陷,而且这些小分子的封尾基团在低pH值反相色谱的别离中极易从固定相上水解下来,使其在pH3时抗干扰、耐用性不强,封尾的色谱柱在中等与高pH值(pH=6~9)时更安稳。
改动键合基团的性质,如在烷基键合相中引进极性基团掩蔽残留硅羟基,运用碱安稳的金属氧化物如ZrO2、TiO2、MgO等涂覆SiO2外表也可提高固定相的安稳性,使其适用于更多的范畴。此外,运用维护柱也能够对剖析柱起到必定的维护效果。
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